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据悉,研究以激活底物靶ssDNA做对照,设计靶RNA激活CRISRP-Cas14a1反式切割的生化实验,包括靶RNA的长度及缺失,sgRNA靶向片段的长度及靶RNA单碱基突变等一系列试验。研究发现:靶RNA(20 nt)激活Cas14a1反式切割活性最好,3’端相比5’端缺失碱基对Cas14a1酶的反式切割活性影响更大;且Cas14a1区分靶RNA单碱基错配能力要优于靶ssDNA。该研究使CRISPR/Cas14a1系统具有诊断RNA单碱基错配的潜力,为开发RNA单碱基诊断和成像技术奠定理论基础。



论文信息:trans Single-Stranded DNA Cleavage via CRISPR/Cas14a1 Activated by Target RNA without Destruction


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